美托洛尔对伊伐布雷定基于OCT1介导肝脏摄取的的影响

摘要 目的：初步探明美托洛尔对伊伐布雷定肝脏摄取的影响。方法：采用原代肝细胞，分为对照组：伊伐布雷定(0.2 µM、0.5 µM、1 µM)，实验组：美托洛尔 (0.5 µM、1.0 µM、2.0 µM)+伊伐布雷定(0.2 µM、0.5 µM、1 µM)，探讨美托洛尔对伊伐布雷定肝脏摄取的影响。结果：美托洛尔明显抑制肝细胞对伊伐布雷定的摄取，抑制作用随美托洛尔的浓度增加而增强。结论：美托洛尔可以抑制伐布雷定的肝脏摄取。

关键词：伊伐布雷定；美托洛尔；有机阳离子转运体1

伊伐布雷定是第一个窦房结If 电流选择特异性抑制剂，主要用于治疗对β受体阻滞药禁忌或不能耐受的慢性稳定型心绞痛[1]。近年来，伊伐布雷定与美托洛尔常联合应用于心血管疾病的治疗[2]。有研究表明美托洛尔是OCT1的底物[3] 。本实验室研究发现伊伐布雷定的肝脏摄取与OCT1相关[4]，并探明美托洛尔可以改变伊伐布雷定的药代动力学特征，因此我们通过大鼠原代肝细胞模型，初步探明美托洛尔改变伊伐布雷定的药代动力学特征的机制，为临床美托洛尔和伊伐布雷定的联合应用提供实验依据。

1 材料

1.1 仪器

高效液相质谱联用仪：Agilent 6410 triple quad LC/MS；XW-80A 型旋涡混合器（原上海医科大学仪器厂）

1.2 药品及试剂

盐酸伊伐布雷定对照品（批号：090701，含量99.3%，石药集团欧意药业有限公司）；内标盐酸多奈哌齐（批号：100650-200301，中国生物制品检定所）；酒石酸美托洛尔（批号：100084-201403，中国生物制品检定所提供）

2 方法

2.1样品处理方法

取美托洛尔生物样品0.5 mL，加200 µg·L-1内标多奈哌齐溶液50 µL，再加2 mL乙酸乙酯，旋涡振荡3 min，3000 r·min-1离心15 min，取上层有机相1.9 mL，氮气挥干。残留物流动相200 µL溶解，旋涡振荡10 s，4000 r·min-1离心 10 min，吸取上清液1µL进样。

2.2 美托洛尔对肝细胞摄取伊伐布雷定的影响

对照组：伊伐布雷定(0.2µM、0.5µM、1µM)，实验组：美托洛尔(0.5µM、1.0µM、2.0µM)+伊伐布雷定(0.2µM、0.5µM、1µM)组，在温度37℃、5%CO2及饱和湿度条件下孵40min，吸去培养液，洗涤，保存待测。

3结果

如图1所示，与对照组相比，在各浓度的实验组中，肝脏摄取伊伐布雷定的量随着美托洛尔浓度的增加而减少，结果具有统计学意义（P <0.05或P <0.01），表明美托洛尔对伊伐布雷定肝脏摄取具有抑制作用，且抑制作用与随美托洛尔的浓度成正相关。

图1 美托洛尔对肝细胞摄取伊伐布雷定的影响(n=4)

Fig 3   The effect of series concentrations of metoprolol on uptake of ivabradine in primary liver cells(n=4)  

4.讨论

近年来，大量的临床研究表明伊伐布雷定与β受体阻断药均可用于治疗各种心血管疾病，如心绞痛、心律失常、心力衰竭等。 目前β受体阻断药与伊伐布雷定的联合用药研究，主要在药效学方面，而β受体阻断药与伊伐布雷定是否存在药代动力学方面的相互作用，这方面的研究相对较少。

本实验室已经探明美托洛尔可以改变伊伐布雷定的药代动力学特征，因此进一步进行美托洛尔对伊伐布雷定肝脏摄取的影响实验探明其机制，结果表明美托洛尔可以抑制肝细胞对伊伐布雷定的摄取，抑制作用随美托洛尔浓度的增加而增强。同为OCT1的底物，美托洛尔和伊伐布雷定可能竞争同一个转运体OCT1，从而影响伊伐布雷定的肝脏摄取，这可能是美托洛尔影响伊伐布雷定药代动力学特性改变的主要原因，提示美托洛尔和伊伐布雷定临床合用时，应该考虑调整剂量。

本研究仅仅从细胞水平探讨了美托洛尔对伊伐布雷定肝脏转运的影响，今后将采用质粒转染、基因敲除、临床研究等实验手段和方法，进一步的探讨美托洛尔对伊伐布雷定肝脏摄取的影响，为临床美托洛尔和伊伐布雷定的是否发生相互作用提供更加可靠的依据。

参考文献

Tardif   JC. Clinical eff icacy of ivabradine[ J] . Heart Drug,2005, 5 (1) : 25 – 28

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OT Hassan,RT Hassan,RR Arora. Organic Cation Transporter–Mediated Clearance of Cardiovascular Drugs: A Pharmacological Perspective   American[J]. Journal of Therapeutics2014,23(3):855-61

李文,陈达林,谢癸亮. 依法布雷肝脏转运机制的初步研究[J].中国医院药学杂志，2018,14（38）：25-28