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不同免疫学方法对乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测结果影响发表时间:2023-03-24 17:39来源:贵州省六盘水市人民医院 553000 不同免疫学方法对乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测结果影响 周清 贵州省六盘水市人民医院 553000 【摘要】 目的 分析不同免疫学方法对乙肝病毒感染血清学标志物检测结果影响。方法 于2020年1月-2020年4月开展研究,将于本院实施乙肝病毒感染血清学标志物-乙肝两对半检测的10304例患者纳入研究。对其临床资料进行回顾性分析,将实施酶联免疫吸附试验测定法(ELISA)检测的5152例患者纳入A组,将实施化学发光免疫分析法(CLIA)检测的5152例患者纳入B组。对两组乙肝两对半检测结果进行分析。结果 B组HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性检出率均高于A组(P<0.05)。B组对乙肝病毒感染诊断准确率高于A组(P<0.05)。结论 乙肝病毒感染血清学标志物检测中,应用CLIA法检验,对临床指标的检出价值更高,可提升疾病诊断准确率,为临床诊疗提供科学依据。 【关键词】 乙肝病毒感染;血清学标志物;ELISA;CLIA 乙型肝炎属于比较常见的消化系统病变,乙肝病毒感染是其主要发病诱因。对于乙型肝炎患者来说,疾病进一步发展,不仅导致肝脏功能受损,还会累及全身多器官、系统,甚至引发全身性病变。乙型肝炎目前在我国乃至全世界范围内都有较高的发病率,影响极大。因此,有效检出疾病并控制疾病进展,避免出现肝硬化、肝癌等严重后果,是全世界医学领域努力的目标[1]。乙型肝炎发病群体比较广泛,且传染性高,是影响社会公共卫生安全的重大疾病。目前,乙型肝炎的临床检查中,以乙肝两对半检测为主要检查方式,可通过对乙型肝炎患者血液中是否携带乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)、乙肝核心抗体(抗-HBc)等乙肝病毒感染血清学标志物,并通过其不同组合对患者乙肝病毒感染情况及预后进行评估[2]。在乙肝病毒感染血清学标志物的临床检测中,ELISA及CLIA都是常用的免疫检测方法,本次研究这两种免疫检测方法在乙肝病毒感染血清标志物检查中的应用效果进行分析,为临床研究提供循证证据。现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 将2020年1月-2020年4月收治的于本院实施乙肝病毒感染血清学标志物检测的10304例患者纳入研究。将实施酶联免疫吸附试验测定法(ELISA)检测的5152例患者纳入A组,将实施化学发光免疫分析法(CLIA)检测的5152例患者纳入B组。A组,男2661例,女2491例,年龄20-72岁,平均(32.0±6.2)岁,病程1-10年,平均(5.2±2.1)年;B组,男2661例,女2491例,年龄20-72岁,平均(32.7±5.7)岁,病程1-10年,平均(5.6±1.3)年,研究经医院伦理委员会批准。纳入标准:确诊的乙肝病毒感染患者均符合《2015年慢性乙型病毒性肝炎防治指南》中的诊断标准;均经病理诊断确诊;患者及家属对本次研究知情同意;分组资料,具有同质性(P>0.05)。 1.2 方法 A组采用ELISA法开展乙肝病毒感染血清标志物检测,检测指标包括乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒 e 抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb),获取空腹状态下外周静脉血,不能及时送检的样本置于4℃专用冰箱中保存。将标本进行离心处理,速度为3500r/min,离心10min。血清分离后,采用ELISA法检验。仪器为美国BioTek ELX-808型酶标仪及英料新创(夏门)科技股份有限公司试剂盒进行检测。检测过程中,注意严格按照规范化的操作步骤及说明书内容操作。 B组采用CLIA法检测,获取空腹状态下外周静脉血,不能及时送检的样本置于4℃专用冰箱中保存。常规以3500r/min离心10min分离血清后,采用CLIA法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒 e 抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb),检测仪器为迈克医疗电子有限公司生产i3000全自动化学发光免疫分析仪进行检测,试剂盒为迈克生物股份有限公司生产的配套试剂。根据标准检验流程及说明书内容开展临床检测。 1.3 观察指标 对两组乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率进行对比;统计两种不同免疫检测方法对乙肝病毒感染的检出价值 [3]。 1.4 统计学分析 以SPSS 20.0软件对比数据。以n(%)表示计数数据,检验值为X2;以(±s)表示计量数据,检验值为t。P<0.05,对比有统计学差异。 2 结果 2.1 乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率对比 B组HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性检出率均高于A组(P<0.05)。见表1。 表 1 两组乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率对比[n(%)]
2.2 两种不同免疫检测方法对乙肝病毒感染的检出准确率对比 B组对乙肝病毒感染诊断准确率高于A组(P<0.05)。见表2。 表 2 两种不同免疫检测方法对乙肝病毒感染的检出准确率对比[n(%)]
3 讨论 乙型病毒性肝炎属于一种常见的传染性疾病,是由于乙型肝炎病毒感染导致的肝脏炎性病变,可引发肝脏持续性损伤,引发不良预后。乙型肝炎病毒感染以上腹部不适及恶心呕吐、食欲不振等为主要发病症状,不及时治疗将影响患者的生命健康安全。 乙型肝炎病毒(HBV)在分类上归属于嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属。HBV感染的临床表现呈多样性,可表现为无症状HBV携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎,HBV的致病机制迄今尚未完全清楚,大量的研究结果表明,免疫病理反应以及病毒与宿主细胞间的相互作用是肝细胞损伤的主要原因。HBV侵入机体后,首先感染以肝细胞为主的多种细胞,在细胞内复制产生完整的病毒颗粒并分泌HBsAg、HBeAg和HBcAg等抗原成分。在血液或肝细胞膜上的病毒抗原成分为可诱导机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。免疫反应的强弱与临床过程的轻重及转归有密切关系。经临床研究显示[4],我国乙型肝炎发病率占全世界发病率的75%左右,且约有30%左右的病例有进展为肝硬化或者肝癌的风险,由此可见,乙型肝炎对人类生命健康安全的影响较大。 乙型肝炎的诊断依赖血清学标志物检测,乙肝五项为常规检查方式,也就是俗称的乙肝两对半[5]。HBsAg是反映是否存在乙肝病毒感染的最主要的指标,健康人应为阴性,阳性表示感染了乙肝病毒。HBsAb是HBV的特异性中和抗体,见于乙性肝炎恢复期、既往HBV感染者或接种HBV疫苗后。抗-HBs的出现表示机体对乙型肝炎有免疫力。HBeAg检测阳性,证实患者体内乙肝病毒复制活跃,传染性强,如转为阴性,表示病毒停止复制。HBeAb表示乙肝病毒复制能力减弱,传染性降低;或乙肝病毒发生基因突变,无法产生e抗原,但乙肝病毒复制活动其实更加活跃[6]。HBcAb检测结果阳性表示正感染乙肝病毒或过去曾感染过乙肝病毒。本次采取不同免疫方法进行乙肝病毒感染血清学标志物检测,研究结果显示,B组HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性检出率均高于A组(P<0.05)。B组对乙肝病毒感染诊断准确率高于A组(P<0.05)。这一研究结果,说明采用CLIA技术检测乙肝病毒感染,检出阳性率较高,对疾病的准确检出循证依据。CLIA及ELISA都是临床常用的检验乙型肝炎病毒的有效检测方法。其中,酶联免疫法又称为固相酶联免疫测定法, 是通过化学反应连接检测对象和酶, 检测对象和固相载体上的抗原经免疫反应结合,再加入底物,进行显色。通过对比颜色的深浅,判断抗体的水平。 ELISA免疫检测方法是传统检验方法,具有灵敏度高、 特异性强、 检测费用低、 无污染等优点。 然而,该种检测方法也存在操作步骤多而繁琐,操作时间较长, 影响因素多等缺陷。且这种检查方式的不足还有初筛弱阳性在复查时可能为阴性,重复性较差。CLIA法是通过化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法,可多次重复检查,灵敏度高。其作用原理,是以磁微粒为固相载体,利用多重磁分离技术,结合游离部分高效分离,磁微粒增大反应面积及加快反应,保证发光强度及时间,因而有助于提升检测准确性[7]。CLIA法借助发光底物自身发光强度进行指标测定,具有极高的的灵敏度,能够显著降低临床漏诊及误诊情况。且该检查方式对于灰区有较好的检验效果,可客观的判断灰区情况,因而对疾病的诊断价值显著。具有更加宽广的线性范围, 主要对乙肝病毒进行定量检测,在临床实验室检测中应用极为广泛。 综上所述,与 ELISA检测法相比,CLIA法在乙肝病毒感染血清标志物检测中,可对病毒标志物进行定量分析,相比ELISA法定性分析对乙肝病毒血清标志物的检出率更高。用化学发光法检测乙肝两对半具有灵敏度高,重复性好,特异性强,准确性佳,检测快速,应积极推广使用,以便让医生能够对乙肝患者的病程、治疗、预后和病情疗效作出合理的解释提供依据。 参考文献: [1]谢晓婷,梁健夫.不同免疫检测法在乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测中的应用[J].中国民间疗法,2019,27(23):75-76. [2]宋兴丽.不同免疫检验方法对乙型肝炎病毒感染血清学标志物的检测效果比较[J].抗感染药学,2019,16(1):90-92. [3]龙润,郭虹忆,杨静.柴苓汤对慢性乙型肝炎病毒感染不同阶段细胞免疫及病毒清除的影响[J].中华中医药学刊,2019,37(4):985-988. [4]王得权.血清免疫学指标在慢性HBV感染检测中的应用[J].河南预防医学杂志,2019,30(1):57-58+77. [5]张玲、郑荣、何三军、魏少军、唐寒秋、冯仕川.慢性乙型肝炎患者HBV-DNA载量,肝功能指标与免疫学标志物的相关性研究[J].检验医学与临床,2020,v.17(22):122-124. [6]吴志东,方伟祯.乙型肝炎病毒慢性感染的临床免疫学检测的重要性[J].深圳中西医结合杂志,2019,29(4):77-79. [7] Cs A , Fs A , Ska B . Performance evaluation of nine different syphilis serological tests in comparison with the FTA-abs test[J]. Journal of Immunological Methods, 2019, 464:9-14. |