社区不同年龄健康老年人群D-二聚体生物参考区间的建立

摘要：目的 建立社区不同年龄健康老年人群D-二聚体的生物参考区间，为临床医生在判断老年人临床出血/血栓等疾病提供更精确的参考。方法 收集2021年-2023年虹口区江湾镇街道社区不同年龄健康老年人群（480例）的血液，按年龄分为4组，60-69岁，70-79岁，80-89岁，大于90岁，各120名入选；使用日本积水公司CP3000全自动凝血分析仪免疫比浊法检测血浆D-二聚体水平。采用spss 27.0统计学软件分析数据，生物参考区间的以百分位P2.5和百分位P97.5表示，建立相应年龄段的生物参考区间。并比较各年龄段及不同性别之间的血浆D－二聚体水平的差异。结果 ⑴各年龄段血浆D-二聚体水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。并初步制定了60岁以上各年龄段血浆D-二聚体参考区间，60-69岁D-二聚体参考区间为0.77（0.72,0.84 ）μg/mL，70-79岁D-二聚体参考区间为0.86（0.84,0.94）μg/mL，80-89岁D-二聚体参考区间为1.01（0.96,1.07）μg/mL，90-100岁D-二聚体参考区间为1.17（0.99,1.39）μg/mL。（2）年龄和D-二聚体含量的呈正相关（r =0.873，P<0.001），D－二聚体的含量随年龄增长而增高。（3）不同性别血浆D-二聚体含量的分析，60岁以上各年龄段不同性别间无统计学差异（ P＞0.05)。结论 健康老年人群D-二聚体随年龄增长而呈上升趋势，60岁以上老年人群男女性别无统计学差异，60岁以上老年人群应建立不同年龄段的D-二聚体的生物参考区间。

关键词：健康老年人群；D-二聚体；生物参考区间

中图分类号：R446

Establishment of D-dimer biological reference interval n the healthy elderly community population 

Yan Anlan   Meng Yaojun 

(Laboratory Department, Jiangwan Hospital, Hongkou District, Shanghai)

Abstract: Establish a biological reference interval for D-dimer in healthy elderly populations of different ages in Hongkou District, providing more accurate references for clinical doctors in diagnosing diseases such as bleeding/thrombosis in the elderly .Method: Blood was collected from different healthy elderly groups (480 cases) in the community of Jiangwan Town, Hongkou District from 2021 to 2023, which was divided into 4 groups: 60-69,70-79-79,80-80, more than 90 each; plasma D-dimer level was measured by using CP3000 automatic coagulation analyzer. The data were analyzed using spss 27.0 statistical software, and the biological reference intervals were expressed as percentile P2.5 and percentile P97.5 to establish the biological reference intervals for the corresponding age groups. And compare differences in plasma D-dimer levels between ages and sexes.Result ⑴Plasma D-dimer levels were compared at all ages (P <0.05).The plasma D-dimer reference interval, and the D-dimer between age 60-69 was 0.77 (0.72,0.84) μ g / mL,the reference interval of D-dimer aged 70-79 is 0.86 (0.84,0.94) μg/mL,the reference interval of D-dimer aged 80-89 is 1.01 (0.96,1.07) μg/mL,the reference interval of the D-dimer at age 90-100 years was 1.17 (0.99,1.39) μg/mL.(2) Age and D-dimer content were positively correlated (r =0.873, P <0.001), and the content of D-dimer increased with age.(3) Analysis of plasma D-dimer content in different sexes, and there was no statistical difference between different sexes over 60 years of age (P> 0.05). Conclusion: The D-dimers in healthy elderly people are increasing with age, and there is no statistical difference between men and women in elderly people over 60 years of age, so a biological reference interval for D-dimers in different ages should be established.

Keywords: Healthy elderly population; D-dimer; biological reference interval

二聚体（D-dimer）是交联纤维蛋白的降解产物，是体内凝血和纤溶系统活化的重要标志物[1]，在临床中涉及凝血功能紊乱相关疾病的诊断和预防上有着广泛的应用[2-4]。但D-二聚体随年龄增长而会显著出现增高，特别是＞80岁老人建议的cut-off值远远超过正常人[5]。科学的建立一个地区健康老年人群的D－二聚体生物参考区间对于临床医生在判断老年人临床凝血系统紊乱等疾病时能提供更精确的参考。本研究采用的方法学为乳胶增强免疫比浊法，使用日本积水公司CP3000全自动凝血分析仪测定了480例健康老年人群的血浆D－二聚体水平，旨在建立本地区的健康老年人群的参考区间，为临床提供更为高效的诊疗参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2021年1月-2024年1月社区健康老年人群共480例。根据年龄分为4组(组1：60岁-69岁；组2：70岁-79岁；组3：80-89岁；组4：90-100岁；)，平均年龄79.49岁，男性197人，女性203人。

1.2 排除标准

临床诊断：排除心、脑血管疾病、血液病、肝、肾疾病、糖尿病、高血压。心电图正常；血、尿常规正常；血清总胆固醇小于 5.20 mmol/L，甘油三酯小于1.70 mmol/L，空腹血糖小于6.10 mmol/L，谷丙转氨酶小于42 U/L，谷草转氨酶小于37 U/L，谷氨酰氨基转移酶小于45 U/L，尿素小于8.30 mmol/L,肌酐小于197 umol/L；血压低于140/90 mmHg。

1.3 仪器与试剂

本实验室检测系统为日本日本积水医疗科技（中国）有限公司的全自动血凝分析仪CP3000，D－二聚体检测试剂盒、校准品及质控品均由日本积水医疗科技（中国）有限公司提供。

1.4 方法

空腹采取静脉血2mL于含0.109mol/L枸橼酸酸钠0.2mL的真空采血管中，抗凝剂与静脉血比例为1:9,立即混匀，1500r/min离心15分钟。检测标本时试剂盒内两种试剂组分1:1配套使用，用同一试剂盒提供的D－二聚体校准品校准每批D－二聚体试剂盒。测试的每一天对每瓶试剂进行质控品测定高、低两种检测范围，判断结果是否在控，以确保仪器正常运行，保证检测结果的准确性。标本采集后2H内完成检测。所有操作严格按试剂和仪器操作说明书进行。

1.5 统计方法

采用spss27.0统计学软件分析数据。符合正态分布的计量资料以均值±标准差表示，组间比较采用方差分析。非正态分布的计量资料以中位数表示，组间比较采用非参数检验，进行相关性分析，生物参考区间制定为2.5%的百分位点到97.5%的百分位点所在区间，以中位数（P2.5，P97.5）表示；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 资料描述

共纳入480例患者，其中60-69岁120例，70-79岁120例，80-89岁120例，90-100岁120例，D-二聚体浓度最小值0.72 ug/ml,最大值1.42 ug/ml,平均0.96±0.16 ug/ml,中位数0.95 ug/ml。

2.2 各年龄段D-二聚体参数比较

按年龄分为4组，60-69岁的D－二聚体水平为0.77±0.04 ug/ml，70-79岁的D－二聚体水平为0.87±0.03 ug/ml，80-89岁的D－二聚体水平为1.01±0.03 ug/ml，90-100岁的D－二聚体水平为1.18±0.09 ug/ml，4组间采用方差分析，差异有统计学意义（F =1070.251，P<0.001)；其中70-79岁，80-89岁，≥90岁的血浆D-二聚体水平均高于60-69岁组，各年龄段组间比较均有统计学差异（P＜0.05）。60岁以后血浆D-二聚体浓度值随年龄增长升高，见表1。

2.3 60岁以上各年龄段D-二聚体参考区间

制定了以下4组健康老年人群D-二聚体不同年龄段正常生物参考区间，即2.5%的百分位点到97.5%的百分位点所在区间，以中位数（P2.5，P97.5）表示，60-69岁D-二聚体的生物参考区间为0.77（0.72,0.84），70-79岁D-二聚体的生物参考区间为0.86（0.84,0.94），80-89岁D-二聚体的生物参考区间为1.01（0.96,1.07），大于90岁D-二聚体的生物参考区间为1.17（0.99,1.39），见表2。

2.4 年龄和D-dimer的相关性分析

D－二聚体的含量与年龄呈正相关（r=0.873,P<0.001）；回归方程为DD=0.111+0.011*age，D－二聚体的含量随年龄增长而增高。

2.5 不同性别血浆D-二聚体含量的分析

60岁以上不同年龄段男性和女性D-二聚体总体水平比较无统计学差异（P＝0.707>0.05），分组比较60-69岁P＝0.586>0.05，70-79岁P＝0.973>0.05，80-89岁P＝0.601>0.05，90-100岁P＝0.810>0.05，差异均无统计学意义，见表3。

3 讨论

D-二聚体是机体凝血活化和继发纤溶激活的标志物[6-7]，因此D-二聚体在多种疾病中都有重要的提示作用，同时D-二聚体在不同疾病情况中的升高幅度不同，在老年人群中，特别是大于60岁以上的老年人群由于各组织器官退行性改变，造血系统、血管、止血和凝血功能也随之减退，同时老年人又多数有合并其他疾病，并接受多种药物治疗，因此影响老年人止血和凝血过程，造成了老年人较其他年龄段更容易发生出血与血栓性疾病[8]。本研究使用的方法学为乳胶增强免疫比浊法，试剂为日本积水提供，尽管积水试剂有优秀的开瓶稳定性（30天以上），同时采用双液体试剂1:1配套使用，可直接上机无需配置，避免了操作上的误差，目前临床常用的D-二聚体的生物参考区间为0-1 ug/ml,而在实际临床应用中，部分老年人群的D-二聚体水平高于此值，因而，老年人的相关凝血指标会与正常人的生物参考区间有所差异，这就会对临床医生进行疾病判断和诊疗带来困难。2023年中国研究型医院学会血栓与止血专业委员会也提出老年人健康人群的D-二聚体结果偏高，如有需要可建立此类特定人群的参考区间[9]。但目前国内尚无针对老年人群D-二聚体的生物参考区间。

本研究通过480例健康老年人群血浆D-二聚体检测，调查虹口区江湾镇社区健康老年人群血浆D-二聚体水平，建立了健康老年人群不同年龄段正常生物参考区间。结果显示，60岁以上老年人群男性与女性的D-二聚体水平无统计学差异（p>0.05)，这也与姚伟[10]等研究一致；国内外的多项研究[11]证明D-二聚体水平会随着年龄的增高而呈上升趋势，且与年龄呈正相关（r=0.873），在>80岁后尤为明显，说明老年人群随着机体功能退化凝血系统功能也越来越减退，使其机体处于高凝状态从而激活纤溶系统，因此老年人D-二聚体水平会高与年轻人，而目前国内临床应用的生物参考区间并无具体的体现，这也表明D-二聚体在临床应用中尚未完全实现标准化，因此对于老年人群在各项疾病中的应用也造成诸多困扰[12-14]，综上所述，目前国内临床使用的D-二聚体生物参考区间并不适合60岁以上老年人群，本研究按照老年人群不同年龄段分别建立了生物参考区间，60-69岁D-二聚体的生物参考区间为0.77（0.72,0.84），70-79岁D-二聚体的生物参考区间为0.86（0.84,0.94），80-89岁D-二聚体的生物参考区间为1.01（0.96,1.07），90-100岁D-二聚体的生物参考区间为1.17（0.99,1.39）为临床治疗提供参考，尤其是80岁以上老年人群已超出目前临床的常用生物参考区间，因此在对于这类病人的治疗判断上检验部门应该与临床部门沟通采用新的标准以提高临床诊疗的效能。

然而由于本研究的样本量偏少，且局限于单中心来源，如能收集多个跨区域的临床研究中心的更多的数据支持便可制定出更为精准的生物参考区间，目前临床常用的D-二聚体检测方法主要包括全血凝集检测法、酶联免疫吸附法或酶联免疫荧光法、乳胶增强免疫比浊法及化学发光法[6-7][15]，不同的凝血检测系统之间的D-二聚体检测结果可比性差，即使是基于相同检测原理的不同试剂盒，其检测结果也有很大的差异[16]，由于检测方法的局限，本研究使用的方法学为乳胶增强免疫比浊法，试剂和仪器均为日本积水医疗科技（中国）有限公司提供，仅限相同的方法学和本检测系统参考，其他方法学及凝血检测系统还有待更多研究。

参考文献

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基金项目：上海市虹口区江湾医院院级科研项目（江湾KY2022-27）。